根據(jù)臨床初步診斷及待檢細(xì)菌的種類,可選用不同環(huán)境條件進(jìn)行培養(yǎng)。常用的有需氧培養(yǎng)法、二氧化碳培養(yǎng)法和厭氧培養(yǎng)法。為了提高檢驗(yàn)的正確率,同一標(biāo)本常同時采用兩種或三種不同的培養(yǎng)法。
需氧培養(yǎng)法 本法是臨床細(xì)菌室常用的培養(yǎng)方法,適于一般需氧和兼性厭氧菌的培養(yǎng)。將已接種好的平板、斜面和液體培養(yǎng)基等,置于35℃溫箱中孵育18~24h,一般細(xì)菌可于培養(yǎng)基上生長,但有些難以生長的細(xì)菌需培養(yǎng)更長的時間才能生長。另外,有的細(xì)菌適生長溫度是28℃~30℃,如鼠疫耶爾森菌,甚至在4℃也能生長,如李斯特菌。
二氧化碳培養(yǎng)法 有些細(xì)菌初次分離培養(yǎng)時須置5%~l0%C02環(huán)境才能生長良好,如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌,牛布魯菌等。常以下列方法供給C02。
1.二氧化碳培養(yǎng)箱:是一臺特制的培養(yǎng)箱,既能調(diào)節(jié)C02的含量,又能調(diào)節(jié)所需的溫度。C02從鋼瓶通過培養(yǎng)箱的C02,運(yùn)送管進(jìn)入培養(yǎng)箱內(nèi),調(diào)節(jié)好所需C02,濃度自動控制器后,將接種好的培養(yǎng)基直接放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)即可。此法適于大型實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用。
2.燭缸法:將已接種好的培養(yǎng)基置干燥器內(nèi),并放入點(diǎn)燃的蠟燭。干燥器蓋的邊緣涂上凡士林,蓋上蓋子,燭光經(jīng)幾分鐘后自行熄滅,此時干燥器內(nèi)C02含量約占5%~l0%,然后將干燥器放入35℃溫箱內(nèi)培養(yǎng)。培養(yǎng)時間一般為18~24h,少數(shù)菌種需培養(yǎng)3~7天或更長。
3.化學(xué)法:按每升容積加入碳酸氫鈉0.49和濃鹽酸0.35ml的比例,分別置于容器內(nèi)。將容器連同接種好的培養(yǎng)基都放人干燥器內(nèi),蓋緊干燥器的蓋子,傾斜容器使?jié)恹}酸與碳酸氫鈉接觸生成C02。
厭氧培養(yǎng)法 適用于專性厭氧菌和兼性厭氧菌的培養(yǎng)。常用的厭氧培養(yǎng)法有:
①皰肉培養(yǎng)基法;②焦性沒食子酸法;③厭氧罐法;④氣袋法;⑤厭氧培養(yǎng)箱法。
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