雖然細(xì)胞培養(yǎng)物污染不能*消除,因?yàn)槲⑸锸俏覀兊暮愣ò閭H,可以實(shí)施精細(xì)控制的過程以減少發(fā)作的影響。良好的無菌技術(shù),清潔的實(shí)驗(yàn)室和對污染途徑的了解,包括進(jìn)入二氧化碳培養(yǎng)箱本身是至關(guān)重要的。在這里喆圖小編帶大家看看二氧化碳培養(yǎng)箱的使用及其在提供安全環(huán)境中的作用,沒有任何潛在的污染微生物。
細(xì)胞培養(yǎng)依賴于使用培養(yǎng)箱來維持保持細(xì)胞存活的正確條件。二氧化碳專門用于模擬哺乳動物的生理?xiàng)l件。因此,培養(yǎng)箱將細(xì)胞所需的元件結(jié)合:37℃(98.6°F)的穩(wěn)定溫度,7.6的受控pH,與受控的CO 2水平和95%的高相對濕度平衡。不幸的是,哺乳動物細(xì)胞的理想環(huán)境也為我們身體內(nèi)和身上的正常菌群的一系列生物污染物提供了理想的環(huán)境。這就是為什么理解良好的實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐以及如何選擇合適的設(shè)備可以幫助減少污染是如此重要。某些二氧化碳培養(yǎng)箱,例如:
正確:良好的實(shí)驗(yàn)室規(guī)范
良好的實(shí)驗(yàn)室操作是防止污染的有效的方法。穿著一件帶有彈性袖帶的實(shí)驗(yàn)室外套,覆蓋街頭衣服,在開始任何細(xì)胞工作和戴一次性手套之前*洗手,工人可以大大降低潛在的污染。盡可能多地,文化主義者還應(yīng)避免接觸門把手,電話,計(jì)算器等物品; 并綁回長長的頭發(fā)。任何患有感冒或其他呼吸道感染的人應(yīng)做好防護(hù)措施,以盡量減少感染的潛在傳播。
冰箱,冷凍箱,儲物柜和長凳的工作區(qū)域和頂部應(yīng)保持清潔,整潔,無灰塵。地板應(yīng)定期清潔,特別是角落,以減少灰塵和污垢,由于交通在房間里的流通。此外,應(yīng)清潔實(shí)驗(yàn)室設(shè)備(例如,機(jī)械移液器,渦流,水浴,離心機(jī)),并定期檢查污染跡象。沒有適當(dāng)?shù)臒o菌技術(shù)的替代品。文化和媒體應(yīng)只在生物安全柜中打開,不應(yīng)由人員共享。常見的污染途徑是當(dāng)培養(yǎng)基液滴保留在培養(yǎng)容器和其蓋子之間或培養(yǎng)基瓶的頸部上時形成的液體“橋”進(jìn)入。
二氧化碳培養(yǎng)箱作為培養(yǎng)細(xì)胞的家,是保持良好實(shí)驗(yàn)室操作的重點(diǎn)。記住,哺乳動物細(xì)胞的環(huán)境也是微生物伴侶的誘人環(huán)境。由于任何培養(yǎng)箱污染物的進(jìn)入路徑是通過敞開的門,需要建立一個將門開口保持小的工作系統(tǒng)。嘗試限制共享培養(yǎng)箱的人數(shù),以減少污染源。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)和定期清潔程序(每周或每月),并立即使用70%酒精清除任何溢出物。
培養(yǎng)箱設(shè)計(jì):保持污染檢查
二氧化碳培養(yǎng)箱的設(shè)計(jì)可以是減少生物制劑污染的重要因素。有許多有用的功能,簡化清潔,并提供持續(xù)保護(hù),防止日常使用中的污染。這些能力區(qū)分培養(yǎng)箱的選擇,重要的是認(rèn)識到不同制造商的類似選項(xiàng)不一定提供相同的結(jié)果。
容易清洗
當(dāng)孵育器易于清潔并且具有小的內(nèi)表面時,可以顯著地控制微生物的存在。具有圓角的培養(yǎng)箱消除了裂縫和邊緣,微生物可以隱藏和繁榮。電拋光的表面去除微小的凹陷,否則這些微小的凹陷將用作細(xì)菌的隱藏孔。
清潔培養(yǎng)箱時有幾個好的規(guī)則:
從培養(yǎng)箱中取出所有的培養(yǎng)基,并關(guān)閉。
取出培養(yǎng)箱的所有獨(dú)立內(nèi)部組件,并使用肥皂消毒劑清潔它們。
在高壓滅菌器中消毒所有可移動部件。
*清潔所有內(nèi)表面,然后對所有表面涂抹消毒劑,并使其干燥。任何剩余的殘余物可以使用蒸餾水除去。
用70%的酒精擦拭所有表面,讓它們風(fēng)干。
使用70%的酒精消毒培養(yǎng)箱的外部門和手柄。
如果存在水盤,向水中添加安全的抗微生物劑是一個好主意。在平底鍋中使用蒸餾水,每周更換一次。在整個清潔過程中一定要戴手套和實(shí)驗(yàn)室外套,以盡量減少引入新的污染生物體。
高溫消毒
在一些培養(yǎng)箱上可用的方便的選擇是自動化高干熱或濕熱消毒循環(huán)。大多數(shù)這些設(shè)計(jì)為用空培養(yǎng)箱運(yùn)行過夜。高熱消毒提供了一個有效的方法,以確保培養(yǎng)箱的內(nèi)部沒有細(xì)菌,當(dāng)你的細(xì)胞進(jìn)入培養(yǎng)箱在一個清潔周期后。
雖然消毒循環(huán)不能消除對常規(guī)清潔培養(yǎng)箱的需要,但它可以消除對單獨(dú)高壓滅菌內(nèi)部部件的需要,并消除“駐留”污染的風(fēng)險(xiǎn)。
空氣過濾
一些二氧化碳培養(yǎng)箱上的一個常見功能是HEPA過濾器,其將過濾內(nèi)部空氣,去除微生物,微粒,氣溶膠,在一些情況下,揮發(fā)性有機(jī)化學(xué)品。100級HEPA過濾器應(yīng)能快速提供潔凈室空氣質(zhì)量,以便消除通過門進(jìn)入的任何污染物。
考慮在開門之后獲得大空氣質(zhì)量所需的時間,特別是如果頻繁的門開啟是不可避免的。此恢復(fù)時間可能因制造商而異。4 HEPA過濾器需要少量維護(hù),但應(yīng)定期更換(即每六個月)以獲得效果。
一些二氧化碳培養(yǎng)箱提供了銅內(nèi)部的選擇以抑制當(dāng)門打開時可能進(jìn)入培養(yǎng)箱的任何細(xì)菌的生長。如上所述,只有100%的純銅將在幾分鐘內(nèi)有效地消除微生物污染物。固體銅中的Cu 2+離子不會變成空氣傳播,因此培養(yǎng)皿和燒瓶中的培養(yǎng)物沒有風(fēng)險(xiǎn)。這是在細(xì)胞培養(yǎng)培養(yǎng)箱中具有連續(xù)抗微生物保護(hù)的偉大方式,其將持續(xù)培養(yǎng)箱的壽命,同時需要維護(hù)。
防護(hù)外部環(huán)境
大多數(shù)培養(yǎng)箱都有一個固體玻璃內(nèi)門,以保護(hù)樣品免于意外暴露于外部環(huán)境。分開的氣密內(nèi)門將進(jìn)一步有助于小化在門打開之后的暴露和速度恢復(fù)設(shè)定條件。這個分開的內(nèi)門可以提供三個或六個單獨(dú)的較小的門,其允許進(jìn)入培養(yǎng)箱的特定部分而不干擾其他區(qū)域。分隔的內(nèi)門減少了微生物進(jìn)入培養(yǎng)箱的任何機(jī)會,并使來自培養(yǎng)箱的熱,大氣和濕度的損失小化。
外部水源
生命需要水,當(dāng)然包括微生物。雖然他們喜歡在二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)溫暖,潮濕的氣氛,水盤是特別邀請。通常將抗菌化合物,銅線硬幣加到水盤中。具有應(yīng)用或特別有價(jià)值的樣品的實(shí)驗(yàn)室也可以考慮將加濕器水源移動到培養(yǎng)箱外部的培養(yǎng)箱設(shè)計(jì),從而*從培養(yǎng)箱內(nèi)部去除這種污染源。
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