如何選擇細(xì)菌接種方法？
細(xì)菌的接種方法有很多種，如劃線(xiàn)法、涂布法、傾注法、斜面接種法、液體培養(yǎng)基接種法、螺旋接種法等，其方法和應(yīng)用各有不同，小助手將一一解釋?zhuān)詭椭鷮?shí)驗(yàn)人員選擇操作。
一、劃線(xiàn)法
用途：主要用于菌種分純，獲得單菌落。
實(shí)驗(yàn)步驟：由接種環(huán)沾取少許待分離的材料，在無(wú)菌平板表面進(jìn)行平行劃線(xiàn)、扇形劃線(xiàn)或其他形式的連續(xù)劃線(xiàn)（詳見(jiàn)圖1），微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開(kāi)來(lái)，如果劃線(xiàn)適宜的話(huà)，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。
優(yōu)點(diǎn)：可以觀(guān)察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離。
缺點(diǎn)：不能用于菌落計(jì)數(shù)。
二、涂布法
用途：主要用于菌落總數(shù)計(jì)數(shù)。
實(shí)驗(yàn)步驟：先將培養(yǎng)基熔化后趁熱倒入無(wú)菌平板中，然后用無(wú)菌吸管吸取0.1ml菌液接種在已凝固的瓊脂平板上。再用無(wú)菌玻璃棒將菌液在平板上涂抹均勻,將涂抹好的平板平放于桌上20~30min使菌液滲透入培養(yǎng)基內(nèi)，然后將平板倒轉(zhuǎn)，保溫培養(yǎng)，至長(zhǎng)出菌落后即可計(jì)數(shù)。
優(yōu)點(diǎn)：可以計(jì)數(shù)，可以觀(guān)察菌落特征。
缺點(diǎn)：接種前需梯度稀釋?zhuān)樟枯^少，較麻煩，平板不干燥效果不好，容易蔓延。
三、傾倒法
用途：主要用于菌落總數(shù)的計(jì)數(shù)。
實(shí)驗(yàn)步驟：吸取1ml菌液加入平板中，倒入已融化并冷卻至45~50℃的細(xì)菌培養(yǎng)基，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)平使菌液與培養(yǎng)基混合均勻，冷凝后倒置，適溫培養(yǎng)。至長(zhǎng)出菌落后即可計(jì)數(shù)。
優(yōu)點(diǎn)：可以計(jì)數(shù)，較方便。
缺點(diǎn)：接種前需梯度稀釋?zhuān)荒苡^(guān)察菌落特征，不適用于嚴(yán)格好氧菌和熱敏感菌。
四、斜面接種法
用途：主要用于保存菌種，或觀(guān)察細(xì)菌的某些生化特性和動(dòng)力。
實(shí)驗(yàn)步驟：用接種環(huán)或接種針伸入菌種管內(nèi)，挑取用來(lái)移種的菌落。伸入斜面培養(yǎng)管內(nèi)，先從斜面底部到頂端拖一條接種線(xiàn)，再自下而上蜿蜒劃線(xiàn)，或直接自下而上地蜿蜒劃線(xiàn)。接種完成之后，用火焰滅菌培養(yǎng)管口，并塞上棉塞，置于37℃培養(yǎng)（詳見(jiàn)圖2）。
五、液體培養(yǎng)基接種法
用途：主要用于菌液比濁實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)步驟：用滅菌接種環(huán)挑取菌落或標(biāo)本，在試管內(nèi)壁與液面交界處輕輕研磨，使細(xì)菌均勻得散落在液體培養(yǎng)基中。
六、螺旋接種法
用途：此法主要用于菌落總數(shù)計(jì)數(shù)。
Spiral plater 可以在無(wú)任何全部或中間稀釋的情況下快速細(xì)菌接種。對(duì)數(shù)減少的樣品容量以阿基米德螺旋線(xiàn)的形式被自動(dòng)分注在旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)基表面。培養(yǎng)基上每一點(diǎn)的容量可以被知曉和校準(zhǔn)。菌液的濃度可以通過(guò)培養(yǎng)皿上一定區(qū)域的菌落數(shù)量除以同區(qū)域樣品分注量來(lái)計(jì)算。
優(yōu)點(diǎn)：螺旋接種法菌液無(wú)需稀釋(其他接種方法均需經(jīng)過(guò)梯度稀釋才能計(jì)菌落數(shù))，自動(dòng)化接種，效率高，可節(jié)省3/4的耗材和時(shí)間。
缺點(diǎn)：產(chǎn)品成本高，適用于樣品量比較大的實(shí)驗(yàn)。